格兰氏染色流程可概括为：染色-脱色-复染.

第一步初染剂（Primary Stain）：使用结晶紫染色.

第二步媒染剂（Mordant）：加入复方碘溶液或称革兰氏碘液（Gram's Iodine）后会形成不溶性的结晶紫-碘（CV-I）复合体.细菌呈紫黑色.第二步是关键,它的目的是分辨细菌的革兰氏染色特性.若为革兰氏阳性菌,此复合体系结合于细胞壁之镁、核糖核酸组成（Magnesium Ribonucletic Acid）,形成镁-核糖核酸-结晶紫-碘（Mg-RNA-CV-I）复合体,不易脱去.

第三步脱色剂（Decoloring Agent）：使用酒精（95%）脱色,试剂具脂溶剂（Lipid Solvent）和蛋白脱水剂（Protein Dehydrating Agent）之双重功能.此步骤对革兰氏阳性细菌无效,因为细胞壁上厚厚的细胞壁层阻隔了结晶紫-碘复合体的外渗,只能留在细菌体内.革兰氏阴性菌细胞壁层薄,会被脱色而成为无色.

第四步复染剂（Counterstain）：为了对比,在此之后会加入番红（Safranin）进行复染,革兰氏阴性菌成红色,而革兰氏阳性菌仍保有原来的紫色.

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文章来源：天狐定制

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