免疫组化主要用在病理标本上,病理标本制作非常复杂。首先用福尔马林即甲醛进行固定。固定过程会导致福尔马林蛋白和病理标本上原有的抗原进行交联,交联过程会导致抗原发生封闭。另外,后期病理标本的制作过程中,会用到非常多的试剂,比如酒精、二甲苯等。试剂也会造成病理组织本身抗原发生封闭。还有加热过程,也会导致抗原发生封闭。抗原封闭会造成的后果,是使抗原不能非常好的暴露出来,即不能显露出来,最终会导致免疫组化的结果不能够正常表现出阳性,即原来应该阳性的部分由于抗原封闭之后不能造成明显阳性表达,所以会影响免疫组化结果的判断。
全世界都通用叫做抗原封闭修复的方法来解决这个问题。目前最主要的方法主要是两种,一种是化学试剂方法,即用EDTA或者EGTA的方法,都可以使抗原很好被显露出来,从而让免疫组化阳性结果很好的表达出来。另外一种可以用高压加热修复,能使免疫组化的抗原很好的显露出来,从而达到理想的免疫组化结果。
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