高效液相色谱法内标法和外标法处理数据的区别在于方法不同、要求不同、难易成度不同。
一、方法不同
内标法是在分析样品的混合物中加入一定重量的纯物质作为内标,然后对含有内标的样品进行色谱分析,分别确定内标和待测组分的峰面积和相对校正因子。外标法是在空白溶剂中加入一定量的梯度标准物质制成对照品,并与未知样品平行处理检测。
二、要求不同
内标法对于内标的选择要有一定的原则,适合于小样本量的分析,而且样品中的所有组分都不要求达到峰值,只要内标和有关组分达到峰值并且分离良好。外标要求仪器具有可重复性,适用于大量分析样品,因为仪器会随着使用而变化,所以应定期进行曲线校正。
三、难易成度不同
内标法必须准确称量样品和内标,否则会影响实验结果,操作困难。外标法不需要测量校正因子。操作简单,计算方便。
内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校准和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。外标法的中心内容是需要用预测组分的对照样品作出峰高或峰面积对含量(重量或浓度)的校正曲线。校正曲线通常是线性的,并且外推通过原点绘制校正曲线。
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