用化学方法区别甾体皂苷与三萜皂苷的方法有:
(1)醋酐一浓硫酸(Liebermann-Burchard)反应:将样品溶于醋酐中,加入浓硫酸一醋酐(1:20)数滴,呈黄→红→蓝→紫→绿等颜色变化。此反应可以区分三萜皂苷和甾体皂苷,前者最后呈红色或紫色,后者最终呈蓝绿色。
(2)三氯乙酸反应:将含甾体皂苷样品的氯仿溶液滴在滤纸上,加三氯乙酸试液1滴,加热至60℃,生成红色渐变为紫色。在同样条件下三萜皂苷必须加热至100℃才能显色,也生成红色渐变为紫色,可用于纸层析。此方法也可以用于鉴别三萜皂苷和甾体皂苷。
(3)芳香醛一硫酸/高氯酸反应:在使用芳香醛的显色反应中,以香草醛最为普遍,其显色灵敏,常作为甾体皂苷的显色剂。除香草醛外,还有对一二甲氨基苯甲醛。
(4)五氯化锑反应:将皂苷样品溶于三氯甲烷或醇后,点于滤纸上,喷以20%五氯化锑的三氯甲烷溶液(不应含乙醇和水),干燥后60℃~70℃加热,显蓝色、灰蓝色或灰紫色斑点。
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