组织培养繁殖方法的主要程序有如下几步：

（1）配制培养基

培养基是向培养植物提供养分的基质，由植物生长所必须的大量元素、微量元素、有机物质、蔗糖、琼脂（固体培养基用）等物质所组成，称为基本培养基。为了调节培养物的生长和分化，还需附加不同植物生长调节剂，如萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）、6-苄基嘌呤（RA），激动素（KT）以及2，4-1）等。将各种物质配制好，装入三角瓶或试管，高压消毒后备用。

（2）接种材料（外植体）的消毒和接种

从田间将匍匐茎段采回，利用消毒剂（升汞、漂白粉、次氯酸钠等）对茎段进行消毒，杀灭上面所带的细菌和真菌。然后在超净工作台上在无菌条件下剥离茎尖，接种到已配制好的培养基上。置于25℃左右的恒温和16小时光照的条件下培养。

（3）初代培养

是对刚接入的匍匐茎尖（外植体）的培养，目的是使仅为分生组织的茎尖分化出芽和无根小植株。培养基中加的激素是有利于分化的激素，这种培养基叫分化培养基。外植体经30天以上的培养，一个茎尖即可分化出若干无根小植株。

（4）继代培养（增殖培养）

将初代培养形成的无根植株，转入继代培养基上继续培养，使其增殖，经45天左右，会有20～30个无根小苗发生。经过多次的继代培养，使增殖的数量达到一定的要求，即可将无根苗转入生根培养基上，使其生根，形成完整的植株。

（5）生根培养

生根培养基与增殖培养基不同之处是降低或去掉了细胞分裂素类的激素，加入了有利于生根的激素，如吲哚丁酸（IBA）等。无根植株在这种培养基上不再增殖，而是在每株无根苗基部发生若干不定根，形成可以向外移栽的完整秧苗。

（6）移栽

试管苗生根后可直接移栽到温室的土壤中。移栽后的两周内应覆盖薄膜和遮荫，以保持土壤和空气的湿润。

经过上述阶段的培养，一瓶初代培养的苗经几代的增殖可培养出几千株成苗。

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文章来源：天狐定制

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