血液涂片制备鱼染色的目的:
掌握血涂片的制备和染色方法
血液涂片制备鱼染色的原理:
将一小滴血液均匀涂在玻片上,呈单层紧密分布,制成薄血片。用含天青B和伊红的Romannowsky类染料进行染色。细胞中的碱性物质如RBC中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞胞质中的嗜酸性颗粒等与酸性染料伊红结合染成红色;细胞中的酸性物质如淋巴细胞胞质及嗜碱性粒细胞质中的嗜碱性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色;中性粒细胞的中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染成淡紫红色。
血液涂片制备鱼染色的注意事项:
瑞氏染液
新鲜配制的染液偏碱,染色效果较差,经在室温下贮存一定时间,美蓝逐渐转变为天青B后方可使用,这一过程称染料成熟。放置时间愈久,天青B愈多,染色效果愈好,但必须盖严瓶口,以免甲醇挥发或氧化成甲酸。甲醇必须用AR(无丙酮)。染液中也可加中性甘油3ml,防止甲醇挥发,使细胞染色较清晰。
采血(1)不能采集以下部位的血液:①示指或拇指血液。②感染部位血液,如甲沟炎。③耳垂部位血液,含单核细胞太多。 (2)不能使用肝素抗凝标本。 (3)玻片必须清洁、干燥、无尘。①新玻片:应在清洁液中浸泡过夜,然后用水冲洗,最后用蒸馏水冲洗。②已用过的玻片:应在60℃清洁液中加热20min,然后用水冲洗,最后用蒸馏水冲洗。③边缘破碎、表面有划痕的玻片不能再用。 (4)使用玻片时,只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。
制作涂片
许多因素可影响血涂片的厚度,针对不同患者应有的放矢,对血细胞比容高、血粘度高的患者应采用小血滴、小角度、慢推;而贫血患者则应采用大血滴、大角度、快推。
干燥涂片
血涂片干透后方可固定染色,否则细胞尚未牢固地吸附在玻片上,在染色过程中容易脱落。
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文章来源:天狐定制
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