台盼蓝拒染法是一种用于鉴定细胞活力的实验方法。在此方法中，台盼蓝是一种细胞活性染料，它能够通过细胞膜进入细胞内部。活细胞由于细胞膜的完整性，能够有效地阻止台盼蓝进入细胞内，因此不会被染色。相反，细胞一旦损伤或死亡，台盼蓝便能够穿透变性的细胞膜，与解体的DNA结合，导致细胞着色。通过这种方式，我们可以区分活细胞和死细胞。

在进行台盼蓝拒染实验时，有几个关键步骤和注意事项需要遵守：

1. 首先，需要制备单细胞悬液，并将其适当稀释至每毫升含有10^6个细胞。

2. 接下来，将细胞悬液与0.4%的台盼蓝溶液以9:1的比例混合，确保混合均匀。

3. 染色后，应在三分钟内完成计数。使用血细胞计数板分别计数活细胞和死细胞。

4. 结果统计时，可以通过计算活细胞率来确定细胞活力。活细胞率的计算公式为：活细胞总数 / (活细胞总数 + 死细胞总数) × 100%。

5. 需要注意的是，在进行台盼蓝染色时，时间不宜过长。如果染色时间过长，即使是活细胞也可能会被染色，这会干扰计数结果的准确性。

6. 在实验中，使用的台盼蓝母液制备方法为：称取4克台盼蓝，加入少量蒸馏水研磨，然后加入双蒸水至100毫升，并通过滤纸过滤。制备好的母液应在4°C下保存。使用时，用PBS将母液稀释至0.4%。

通过遵循这些步骤和注意事项，我们可以确保台盼蓝拒染实验的准确性和可靠性，从而有效地评估细胞活力。

本文地址： http://www.goggeous.com/20241205/1/328289

文章来源：天狐定制

版权声明：除非特别标注，否则均为本站原创文章，转载时请以链接形式注明文章出处。