酶促反应的初速度v与底物浓度[S]的关系，在特定环境下如温度、pH值和酶浓度相对稳定时，能够直观地反映酶的活性。当底物浓度逐渐增加时，酶促反应的初速度也随之提升，直至酶的所有活性位点都被底物饱和，此时反应速度达到最大值Vmax。米-曼（Michaelis-Menten）方程描述了这一关系，通过该方程可以确定一个重要的参数Km，它定义为反应速度为最大速度一半（v=Vmax/2）时的底物浓度。

Km是酶的一个关键特性参数，测定Km值对于研究酶的动力学至关重要。然而，直接通过米-曼方程作图法求解Km值不够简便，林-贝（Lineweaver-Burk）方程将原始方程变形，利用与的线性关系进行图示，从而简化了Km值的计算过程。本实验通过酵母蔗糖酶作为示例，介绍了如何应用林-贝方程来测定Km值的一种简单方法。

实验过程中，首先确保环境条件恒定，包括温度和pH值，然后调整底物浓度，测量不同底物浓度下的酶促反应速率。通过绘制以底物浓度倒数为横轴、反应速率倒数为纵轴的直线图，可以直观地读取Km值。这种方法不仅操作简便，而且能够有效提高实验结果的准确性和可靠性。

在实际应用中，测定Km值对于理解酶与底物之间的相互作用至关重要。不同的酶具有不同的Km值，这反映了它们对底物的亲和力。通过比较不同酶的Km值，可以进一步分析酶的特性和功能，为酶工程和生物技术的应用提供重要的理论基础。

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文章来源：天狐定制

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