石蜡切片制作是一项细致入微的过程,包括取材、固定、洗涤脱水、透明、浸蜡、包埋、切片粘片、脱蜡、染色等多个步骤。通常,从取材到制成玻片标本可能需要几天时间,但得到的是持久耐用的显微玻片,适合教学、科研和病理分析。取材时,应根据研究目标选择材料,比如洋葱根尖用于观察植物细胞有丝分裂,猪肝小叶适合观察结构,耳蜗则选豚鼠内耳易于操作。
固定是关键环节,使用化学固定液如甲醛、酒精等,可以迅速凝固细胞,防止代谢和自溶,保持组织结构。固定液种类繁多,选择取决于要显示的内容。常用如福尔马林,既能用于常规染色,也有助于其他技术的切片。固定液用量通常是材料体积的20倍,时间根据材料性质和固定液渗透速度而定,通常为几小时至数天。
洗涤与脱水是为了清除固定液,否则影响染色效果。清洗后,组织需逐步脱去水分,常用酒精作为脱水剂,通过逐步升高浓度以减少组织收缩。透明和浸蜡则用石蜡替代透明剂,以支持组织结构。蜡块制作后,需迅速冷却,然后包埋并编号,以确保准确性。
切片过程精细,需要考虑切片刀的锐度和蜡块硬度。切片厚度通常为4至7微米,然后进行贴片和烤片,确保蜡片牢固附着于载玻片上。染色则根据观察需求选择不同染料,如经典的HE染色,让细胞结构呈现出易于观察的颜色。
石蜡切片虽然耗时,但其结果准确且持久,可与新技术结合,拓展了组织学研究的领域。随着科技的进步,石蜡切片技术与其他技术的融合,正在深化对细胞和组织的理解,从形态、功能到代谢的定量测量,为科学研究提供了更全面的视角。
扩展资料
石蜡切片(paraffin section)组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。
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