在RAPD中药材鉴定中,该技术展现出强大的区分能力。1994年,邵鹏柱等人利用Ap2PCR对人参和西洋参进行鉴别,通过特定引物成功地运用RAPD指纹图谱技术,鉴别出两者。1995年,他们进一步研究人参属其他品种和伪品,如三七、桔梗等,使用RAPD标记明显区分了真伪品种。在鉴别菊科植物如“土公英”和蒲公英时,曹晖等人采用Ap2PCR和RAPD技术,发现它们的DNA指纹图谱有显著差异,有助于区分转基因草类。
对于药材基原的鉴定,Yamazaki M等人用酸性缓冲液提取法研究了甘草属植物,通过RAPD分析确认了光果甘草与甘草的遗传关系,而刺毛甘草和刺果甘草则有明显差异,这与RFL P方法的结果一致。曹晖等人利用CTAB法鉴别地胆草和不同商品苦地胆药材,通过DNA指纹图谱的比较,确认了药材的来源。
对于复方制剂和粉剂中的中药材,由于外观特征被破坏,传统鉴定方法受限。然而,通过制备特异性RAPD引物,可以有效鉴定药材的存在。例如,Ozeki等通过RAPD技术鉴别人参制剂,发现其具有高度的辨识能力。黄璐琦等的研究则展示了如何利用RAPD技术对天花粉及其类似品进行分类,解决了粉末药材的鉴定问题。
尽管动物药材的RAPD鉴定文献较少,但王义权等人成功地利用该技术鉴别了不同蛇类,表明DNA标记技术对动物药材的鉴别也具有前景。在药材野生类型与栽培品种的鉴定中,RAPD标记显示出区分遗传特性和品质的重要作用,为野生与栽培品种的鉴别提供了可能。
道地药材的鉴定,如胡珊梅等人用RAPD技术研究泽泻,揭示了道地药材与非道地药材的遗传变异,为快速、准确鉴定道地药材提供了新的手段,为药材品质评价提供了新思路。
扩展资料
RAPD 技术是1990 年发明并发展起来的,RAPD是建立在PCR (Polymerase Chain Reaction)基础之上的一种可对整个未知序列的基因组进行多态性分析的分子技术。其以基因组DNA为模板, 以单个人工合成的随机多态核苷酸序列( 通常为10 个碱基对) 为引物,在热稳定的DNA 聚合酶( Taq 酶) 作用下,进行PCR 扩增。扩增产物经琼脂糖或聚丙烯酰胺电泳分离、溴化乙锭染色后,在紫外透视仪上检测多态性。扩增产物的多态性反映了基因组的多态性。RAPD 技术现已广泛的应用于生物的品种鉴定、系谱分析及进化关系的研究上。
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