本文将详细探讨多糖结构的两种主要分析方法:化学方法和物理分析法。
首先,化学方法是测定多糖结构的常用手段。甲基化分析是其中一种,通过将糖的自由羟基转化为甲醚,再通过还原、水解和乙酰化,生成甲基化单糖衍生物,用气相色谱定性和定量分析,进而确定单糖种类和比例。然而,它无法揭示异头碳糖苷键构型和单糖残基顺序。过碘酸氧化反应在特定条件下进行,可帮助确定单糖连接类型。Smith降解则通过改良的氧化还原过程,获得更多结构信息。部分酸水解则通过短链片段分析推断多糖结构,并有助于特殊糖苷键的断裂。
物理分析法包括红外(IR)、质谱(MS)、核磁共振(NMR)以及分子量测定。IR分析可确定苷键构型,MS和NMR则能提供单糖连接位置和一级结构信息。分子量及其分布对于多糖药物的药效和安全性至关重要,常用凝胶色谱法进行控制。
含量测定方面,多糖通常不含蛋白和氨基酸,但需确保不是混合物。糖醛酸含量测定通常采用硫酸咔唑法,可通过中性糖的校正来减小干扰。含量测定方法多样,包括直接测定多糖本身和利用单糖缩合反应建立的方法,如苯酚-硫酸法。
扩展资料
多糖类(polysaccharide) 是构成生命的四大基本物质之一,广泛存在于高等植物、动物、微生物、地衣和海藻等中,如植物的种子、茎和叶组织、动物粘液、昆虫及甲壳动物的壳真菌、细菌的胞内胞外等。多糖在抗肿瘤、抗炎、抗病毒、降血糖、抗衰老、抗凝血、免疫促进等方面发挥着生物活性作用。具有免疫活性的多糖其衍生物常常还具有其它的活性, 如硫酸化多糖具有抗HIV活性及抗凝血活性, 羧甲基化多糖具有抗肿瘤活性。因此对多糖的研究与开发已越来越引起人们的广泛关注。
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