在进行格朗染色之前，需准备一系列工具和材料，包括干净的载玻片、细菌标本、生理盐水、胶头吸管、接种环、酒精灯以及革兰染液（结晶紫、碘液、95%的乙醇、石碳酸复红液），还需配备计时器。

首先，将一滴生理盐水滴于载玻片上，然后使用接种环取细菌菌落，轻轻混合使之形成均匀的菌膜，让其自然干燥。在干燥后，用酒精灯进行固定，动作需迅速，酒精灯外焰应快速经过玻片2～3次，待冷却后开始染色过程。

初染阶段，将数滴结晶紫染液均匀滴在菌膜上，确保覆盖整个菌膜，染色时间为1分钟，随后使用细流水冲洗至无色为止。

接下来进行媒染步骤，向菌膜上滴加数滴碘液，同样覆盖整个菌膜，染色时间仍为1分钟，完成后也应用细流水冲洗至无色。

脱色阶段最为关键，需要在菌膜上滴加数滴95%的乙醇，轻摇玻片使其均匀脱色，脱色时间约为30秒，直至脱下的酒精无色为止，然后立即用细流水冲洗干净。

整个染色过程需要精确控制时间与温度，以确保染色效果符合预期，从而帮助准确区分细菌类型。

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文章来源：天狐定制

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