在进行格朗染色之前,需准备一系列工具和材料,包括干净的载玻片、细菌标本、生理盐水、胶头吸管、接种环、酒精灯以及革兰染液(结晶紫、碘液、95%的乙醇、石碳酸复红液),还需配备计时器。
首先,将一滴生理盐水滴于载玻片上,然后使用接种环取细菌菌落,轻轻混合使之形成均匀的菌膜,让其自然干燥。在干燥后,用酒精灯进行固定,动作需迅速,酒精灯外焰应快速经过玻片2~3次,待冷却后开始染色过程。
初染阶段,将数滴结晶紫染液均匀滴在菌膜上,确保覆盖整个菌膜,染色时间为1分钟,随后使用细流水冲洗至无色为止。
接下来进行媒染步骤,向菌膜上滴加数滴碘液,同样覆盖整个菌膜,染色时间仍为1分钟,完成后也应用细流水冲洗至无色。
脱色阶段最为关键,需要在菌膜上滴加数滴95%的乙醇,轻摇玻片使其均匀脱色,脱色时间约为30秒,直至脱下的酒精无色为止,然后立即用细流水冲洗干净。
整个染色过程需要精确控制时间与温度,以确保染色效果符合预期,从而帮助准确区分细菌类型。
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文章来源:天狐定制
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