手性HPLC峰面积计算ee值：测定ee值不需要标准品的啊，只需要手性柱把两个异构体分开，然后两个峰面积之差除以两者峰面积之和即可。

首先用手性柱测试外消旋标准品，测试两个对映异构体的峰面积比例（一般1：1，也有不成1：1的）。根据这个比例测定样品ee值。没有标准品，做手性柱，出现两个峰的峰面积之比就是ee值，不需要标准品，做HPLC是要标准品来做标准曲线的。

例如

一个化合物的比旋测得值为—16.3(c0.97，MeOH)，又已知该化合物绝对纯的比旋值为—17．9(c1.16，MeOH)，那么这化合物的光学纯度即e.e.值等于16．3/17．9×100%，为91%。如前所述，通过比旋的测定，得到的光学纯度就是对映体过量的百分数，前提是在特定的条件下，用纯的样品小心地读数。用旋光法测量的对映体过量值应由另一个独立的方法加以确认。

以上内容参考：百度百科-ee值

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