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胶体电泳速度的快慢与哪些因素有关

作者:职业培训 时间: 2025-01-06 16:01:50 阅读:260

与胶体电泳有关的因素有:

1、电场强度。

电场强度是指单位长度的电位降,也被称电势梯度。

电场强度对电泳速度起着正比作用,电场强度越高,带电颗粒移动速度越快。根据实验的需要,电泳可分为两种:一种是高压电泳,所用电压在500~1000V或更高。

由于电压高,电泳时间短(有的样品需数分钟),适用于低分子化合物的分离,如氨基酸,无机离子,包括部分聚焦电泳分离及序列电泳的分离等。

2、溶液的pH。

它决定被分离物质的解离程度和质点的带电性质及所带净电荷量。溶液的pH值决定带电物质的解离程度,也决定物质所带净电荷的多少.对蛋白质,氨基酸等类似两性电解质,pH值离等电点越远,粒子所带电荷越多,泳动速度越快,反之越慢。

因此,当分离某一种混合物时,应选择一种能扩大各种蛋白质所带电荷量差别的pH值,以利于各种蛋白质的有效分离.为了保证电泳过程中溶液的pH值恒定,必须采用缓冲溶液。

3、溶液的离子强度。

溶液的离子强度(Ion intensity)是指溶液中各离子的摩尔浓度与离子价数平方的积的总和的1/2.带电颗粒的迁移率与离子强度的平方根成反比。

低离子强度时,迁移率快,但离子强度过低,缓冲液的缓冲容量小,不易维持pH恒定.高离子强度时,迁移率慢,但电泳谱带要比低离子强度时细窄。通常溶液的离子强度在0.02~0.2之间。

4、电渗。

在电场作用下液体对于固体支持物的相对移动称为电渗。在电场中液体对于一个固体的固定相相对移动称为电渗。在有载体的电泳中,影响电泳移动的一个重要因素是电渗。最常遇到的情况是γ-球蛋白,由原点向负极移动,这就是电渗作用所引起的倒移现象。

产生电渗现象的原因是载体中常含有可电离的基团,如滤纸中含有羟基而带负电荷,与滤纸相接触的水溶液带正电荷,液体便向负极移动。由于电渗现象往往与电泳同时存在,所以带电粒子的移动距离也受电渗影响。

扩展资料:

目前所采用的电泳方法,大致可分为3类:显微电泳,自由界面电泳和区带电泳。区带电泳应用广泛,区带电泳可分为以下几种类型:

1、按支持物的物理性状不同,区带电泳可分为:

(1)滤纸为支持物的纸电泳。

(2)粉末电泳:如纤维素粉,淀粉,玻璃粉电泳。

(3)凝胶电泳:如琼脂,琼脂糖,硅胶,淀粉胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳。

(4)缘线电泳:如尼龙丝,人造丝电泳。

2、按支持物的装置形式不同,区带电泳可分为:

(1)平板式电泳:支持物水平放置,是最常用的电泳方式。

(2)垂直板电泳:聚丙烯酰胺凝胶可做成垂直板式电泳。

(3)柱状(管状)电泳:聚丙烯酰胺凝胶可灌入适当的电泳管中做成管状电泳。

3、按pH的连续性不同,区带电泳可分为:

(1)连续pH电泳:如纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳。

(2)非连续pH电泳:如聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳。

参考资料来源:百度百科——电泳

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文章来源:天狐定制

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