一是水分。水分越低，对热的抵抗力越强。在水中，绝大多数微生物细胞不能耐受超过60℃的温度。而如果是在水分含量低的环境中，对热的耐受力就强得多。所以干热灭菌时，温度要比湿热灭菌高得多。
二是某些化学物质。细菌芽孢对热的抵抗力比营养细菌强得多，营养细胞可以在65－70℃下通过巴氏灭菌的方法杀灭，但细菌芽孢即使是在120℃下，数个小时也不能保持失活。分析得知，在细菌芽孢中，含有较高浓度的2,6－吡啶二羧酸，使细菌芽孢对温度的抵抗力大增。
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