丙酮酸氧化脱羧反应,是连接糖酵解和三羧酸循环的重要环节,由丙酮酸脱氢酶复合体催化,并且需六种辅助因子参加(2分)。
反应机制分为五步:
(1)丙酮酸在TPP、Mg2+存在下,经丙酮酸脱氢酶(E1)作用,脱去羧基,形成中间产物——活性乙醛(1分)。
(2)在硫辛酸、Mg2+存在下,由丙酮酸脱氢酶作用,由形成乙酰二氢硫辛酸(1分)。
(3)在CoASH 、Mg2+存在下,由二氢硫辛酸转乙酰基酶(E2)作用下,形成乙酰CoA和二氢硫辛酸(1分)。
(4)在FAD、Mg2+存在下,由二氢硫辛酸脱氢酶(E3)作用,产生氧化型硫辛酸和FADH2(1分)。
(5)在NAD+存在下,仍由二氢硫辛酸脱氢酶(E3)作用,将FADH2中的氢转给NAD+(1分)。
丙酮酸氧化脱羧反应受下列因素调控:
(1)产物抑制:乙酰CoA和NADH均抑制丙酮酸氧化脱氢酶活性(1分)。
(2)核苷酸反馈调节:E1受GTP抑制,为AMP活化。当细胞内能荷高时,酶系活性下降(1分)。
(3)可逆磷酸化共价调节:丙酮酸脱氢酶特定的丝氨酸残基,能在激酶作用下被ATP磷酸化而使酶失活,但可由磷酸酶作用脱去磷酸而恢复活性。(1分)。
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