麦氏比浊法与麦氏比浊管:精密微生物浓度测定的关键工具
麦氏比浊法,这一创新的微生物浊度标准,由McFarland所创,是临床微生物学检验中不可或缺的工具。它通过精确配置的硫酸与氯化钡比例,生成不同浓度的硫酸钡沉淀,为细菌鉴定和药敏实验提供了可靠的参照。以下是麦氏比浊管的具体配置和使用方法的详细解读:
麦氏比浊管的配制,关键在于精确的化学反应。例如,0.5号麦氏比浊管,由0.05毫升1%氯化钡溶液和9.95毫升1%硫酸精心混合而成,形成稳定的硫酸钡悬浮液。而乳胶粒子悬浮液的麦氏比浊管,因其稳定性更高,适用于长时间保存。
在实际操作中,首先轻摇标准试管,确保均匀。然后,将无菌的待测菌液加入与标准管相同直径的试管,精确调整至与标准管等浓度。通过观察光在不同浓度液体中的折射,借助经验或借助比浊计,读取精确的浊度值。如0.5号管代表1.5×10^8细菌/ml,1.0号管则为3×10^8,通过简单的计算,就能估算出细菌的浓度。
麦氏比浊管的使用需注意,对于大颗粒或浑浊度异常的样品,需要更换新的标准管。它仅适用于微生物数量的粗略估计,而非精密定量。同时,玻璃管和盖子需高压灭菌,且可重复使用。而空白对照则需使用标准无菌生理盐水管,避免混淆。
定量菌株菌悬液制备则涉及一系列梯度稀释。以生理盐水为例,先进行百倍稀释,再逐步增加稀释度,确保每一步稀释后的菌液含菌量是前一倍的1/10。通过这种方法,新手也能轻松操作,但需注意不同细菌的体积差异可能会影响结果,尤其是对芽孢菌和真菌孢子的处理。
比克曼生物的麦氏比浊管系列,提供了不同浓度的选择,便于校准细菌悬浮液。理想的储存条件为2-8摄氏度,专为实验研究设计,而非临床应用。在使用前,确保充分理解麦氏比浊法的局限性,以便获取准确和可靠的实验数据。
总结来说,麦氏比浊法和麦氏比浊管是微生物检验中的重要工具,通过精确的配制和使用,可以快速、简易地评估细菌浓度。然而,它们的精确度和适用性都有其局限性,操作时需结合实际微生物特性进行调整。在科学研究中,它们的准确应用是至关重要的。
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