EST序列，即Expressed Sequence Tags，是基因组研究中的重要工具，但并非完美无缺。ESTs由反转录mRNA生成，其精确度受限于剪切后的单列序列位点，通常只能达到97%的准确度。由于表达倾向（expression bias）的存在，低表达的基因在EST数据库中不易被发现，而高表达的基因则可能过度代表。为了构建理想的cDNA文库，必须采用前处理技术，如均等化（normalization）以减少富集于高表达基因的cDNA数量，以及消减杂交（subtractive hybridization）以去除文库中的冗余克隆，以减少多克隆效应。

华盛顿大学基因组测序中心和Sanger中心合作，通过EST技术，成功完成了秀丽线虫（C.elegans）10亿碱基对的基因组测序项目，这表明ESTs在基因组序列解析中起着关键作用。EST技术的应用不仅限于基因组DNA序列的获取，还能够精确预测基因的内含子和外显子排列，识别选择性接合事件，以及识别基因组的异常排列结构，这些都是基于基因组序列的基因研究中的重要应用。

扩展资料

表达序列标签（expressed sequence tags,ESTs）是指从不同组织来源的cDNA序列。这一概念首次由Adams 等于1991年提出。近年来由此形成的技术路线被广泛应用于基因识别、绘制基因表达图谱、寻找新基因等研究领域，并且取得了显著成效。在通过mRNA差异显示、代表性差异分析等方法获得未知基因的cDNA部分序列后，研究者都迫切希望克隆到其全长cDNA序列，以便对该基因的功能进行研究。

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文章来源：天狐定制

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