在植物组织培养中,对外植体进行表面消毒至关重要。常用的消毒剂包括70%体积分数的酒精和2%至10%质量分数的次氯酸钠溶液。以下是外植体消毒的详细步骤:
1. 清水冲洗:首先,让外植体在清水下冲洗,可加入少量洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,然后在流水下持续冲洗20分钟。
2. 酒精浸泡:用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,然后将其放入70%至75%体积分数的酒精中摇动2至3次,总时间不超过30秒。
3. 无菌水冲洗:将外植体从酒精中取出,在无菌水中震荡冲洗3次。
4. 次氯酸钠溶液浸泡:用无菌吸水纸再次吸干外植体表面的水分,然后将其放入2%至10%的次氯酸钠溶液中浸泡约20分钟。
5. 无菌水清洗:取出外植体,在无菌水中震荡冲洗5次。
注意事项:酒精主要起到表面消毒的作用,而次氯酸钠溶液的消毒能力更强。消毒剂的使用时间应根据外植体的种类来决定。通常,幼嫩的组织如芽尖的消毒时间应较短,而茎和根的消毒时间可以稍长。原则是要彻底杀灭外植体表面的微生物,同时避免损害或杀死外植体本身。除了上述消毒剂,过氧化氢溶液(10%,处理5至15分钟)和氯化汞溶液(0.1%至0.5%,处理2至7分钟)也是有效的消毒剂。然而,需要注意的是氯化汞溶液有毒,使用时必须小心操作。
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文章来源:天狐定制
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