细胞转染是将外源DNA、RNA、蛋白质等分子导入到目标细胞中的一种实验操作。以下是常见的细胞转染方法:
1、化学法转染
常用试剂:例如聚合物如聚乙烯亚胺PEI、聚-L-赖氨酸PLL、聚-L-半胱氨酸PLC;阳离子表面活性剂。
操作步骤:将转染试剂与目标分子(如质粒DNA、siRNA等)混合,形成载体-目标分子复合物。将该复合物加入包含目标细胞的培养基中,使其与细胞发生相互作用,从而导入目标分子。
2、电穿孔法转染
使用电场脉冲使细胞膜电穿孔,以便目标分子能够通过细胞膜进入细胞内。
操作步骤:将细胞与目标分子混合,置于电穿孔仪的电穿孔室中。施加特定的电脉冲,使细胞膜电穿孔,从而实现目标分子的导入。
不同细胞类型和转染试剂之间的适用性和效果可能会有所差异。因此,在进行细胞转染实验时,需根据具体实验目的、细胞类型和目标分子的特性选择合适的转染方法,并优化实验条件以提高转染效率和细胞存活率。
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文章来源:天狐定制
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