酶活力的测定与酶的分离纯化是生物化学中的重要课题。首先，酶活力定义为酶催化特定化学反应的能力，其大小通过单位时间内单位体积中底物的减少或产物的增加量来表示。随着反应时间延长，酶反应速度降低，因此以酶促反应的初速度为准进行研究。

酶的活力单位，即酶单位（U），在国际单位制下表示为每分钟催化1微摩尔底物转化为产物所需的酶量。另一种酶活力单位Kat（简称Kat）则规定为每秒催化1摩尔底物转化为产物所需的酶量，其与U单位的换算关系为1Kat=60×106 IU和1 IU＝1/60μ Kat＝16.7 nKat。

酶的比活力，作为酶纯度的指标，用每毫克蛋白质含有的酶活力单位数表示，比活力高表示酶纯度高。例如，某酶粗提液纯化后，比活力为150 IU/mg蛋白，纯化倍数为15倍，回收率为75%。

酶活力的测定方法包括终点法和动力学法。终点法在酶反应达到一定时间后终止，通过化学或物理方法测定产物或反应物的量变化；动力学法则连续测定反应过程中产物、底物或辅酶的变化量，直接测量酶反应的初速度。常见测定方法包括分光光度法、荧光法、酶偶联法和电化学法。

酶的分离和纯化分为两个方面：浓缩酶制剂以减少体积，以及分离并去除酶制剂中的大量杂蛋白和其他大分子物质。判断分离纯化方法的优势需考虑总活力的回收和比活力提高的倍数。

生物细胞产生的酶分为胞外酶和胞内酶。胞外酶由细胞内产生并分泌到细胞外，如水解酶；胞内酶在细胞内合成并催化反应，数量较多。酶分离纯化应注意选材、破碎、抽提、分离纯化及结晶等步骤，并关注酶活性损失、操作温和性及回收率和纯化倍数。

酶溶液纯化后可通过结晶获得更纯的酶，并通过透析除盐、冰冻干燥等方法制备酶粉，以低温保存。生物化学中的酶通论各章节的思维导图可通过关注"citexs生物易考通"小程序获取，以供学习参考。

以上内容基于生物化学的酶活力测定与酶分离纯化原理，旨在提供对酶相关知识的深入理解与实践操作指南。如有疑问或需进一步详细信息，请随时查阅相关文献资料或联系专业人士。

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文章来源：天狐定制

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